4.1. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином
4.2. Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре
4.3. Непрямая проба Кумбса
4.4. Проба на совместимость с применением 10% желатина
4.5. Проба на совместимость с применением 33% полиглюкина
Проба на индивидуальную совместимость позволяет убедиться в том, что у реципиента нет антител, направленных против эритроцитов донора и таким образом предотвратить трансфузию эритроцитов, несовместимых с кровью больного.
Проба на совместимость, выполняемая на плоскости при комнатной температуре, имеет целью выявить у реципиента полные групповые агглютинины системы АВ0, MNSs, Lewis и др. Проба на совместимость с применением 10% желатина, 33% полиглюкина, непрямая проба Кумбса предназначена для выявления у реципиента неполных групповых антител. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином предусматривает выявление и тех и других антител, в том числе групповых гемолизинов.
Наиболее чувствительной и рекомендуемой является двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином, затем комбинация двух проб — пробы на плоскости при комнатной температуре и непрямой пробы Кумбса. Вместо непрямой пробы Кумбса может быть применена реакция конглютинации с 10% желатином или реакция конглютинации с 33% полиглюкином. Последняя проба уступает по чувствительности первым двум, однако занимает меньше времени.
4.1. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином
Первый этап.
В маркированную пробирку вносят 2 объема (200 мкл) сыворотки реципиента и 1 объем (100 мкл) 2% взвеси трижды отмытых эритроцитов донора, суспендированных в физиологической растворе или LISS (раствор низкой ионной силы). Содержимое пробирки перемешивают и центрифугируют при 2500 об/мин (около 600g) в течение 30 с. Затем оценивают наличие гемолиза в надосадочной жидкости, после чего осадок эритроцитов ресуспендируют, слегка постукивая кончиком пальца по дну пробирки, и определяют наличие агглютинации эритроцитов. При отсутствии выраженного гемолиза и/или агглютинации переходят к выполнению второго этапа пробы с использованием антиглобулиновой сыворотки.
Второй этап.
Пробирку помещают в термостат при температуре 37°С на 30 мин, после чего снова оценивают наличие гемолиза и/или агглютинации эритроцитов. Затем эритроциты трижды отмывают физиологическим раствором, добавляют 2 объема (200 мкл) антиглобулиновой сыворотки для пробы Кумбса и перемешивают. Пробирки центрифугируют в течение 30 с, осадок эритроцитов ресуспензируют и оценивают наличие агглютинации.
Учет результатов проводят невооруженным глазом или через лупу. Выраженный гемолиз и/или агглютинация эритроцитов указывает на присутствие в сыворотке реципиента групповых гемолизинов и/или агглютининов, направленных против эритроцитов донора, и свидетельствует о несовместимости крови реципиента и донора. Отсутствие гемолиза и/или агглютинации эритроцитов свидетельствует о совместимости крови реципиента и донора.
Что такое генетическая несовместимость партнеров?
На долю генетического бесплодия у женщин и мужчин приходится около 10% от всех видов нарушенной фертильности. Основная причина кроется в изменении качества или количества генов, которые хранятся в хромосомах. В результате при делении ядер яйцеклеток и сперматозоидов могут образоваться клетки с неправильным хромосомным набором.
Риск генетической несовместимости повышают следующие факторы:
- чрезмерные дозы облучения;
- неблагоприятная экологическая обстановка;
- браки между кровными родственниками;
- наследственные заболевания.
Отдельно стоит остановиться на возрасте. Чем старше партнеры, тем выше доля хромосомных мутаций, причем в большей степени это касается именно женщин. В среднем после 35 лет увеличивается количество яйцеклеток, которые имеют генетические нарушения. Особенно заметными этими изменения становятся в категории женщин 40+ (доля мутантных ооцитов может достигать 80%).
При тяжелых генетических поломках срабатывает механизм естественного отбора. Эмбрионы с неправильным хромосомным набором рано или поздно останавливаются в своем развитии, что приводит к выкидышу или замершей беременности. Поэтому при наличии повторных потерь беременности паре обязательно показана консультация генетика.
В рамках генетического консультирования паре могут проводиться различные виды анализов:
- кариотипирование;
- экспертная спермгорамма;
- анализ мутаций в конкретных генах, которые чаще всего ассоциированы с бесплодием или привычным невынашиванием;
- FISH-исследование сперматозоидов, яйцеклеток и т.д.
4.2. Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре
На пластинку наносят 2 — 3 капли сыворотки реципиента и добавляют небольшое количество эритроцитов с таким расчетом, чтобы соотношение эритроцитов и сыворотки было 1:10 (для удобства рекомендуется сначала выпустить через иглу несколько капель эритроцитов из контейнера на край пластинки, затем оттуда стеклянной палочкой перенести маленькую каплю эритроцитов в сыворотку). Далее эритроциты перемешивают с сывороткой, пластинку слегка покачивают в течение 5 мин, наблюдая за ходом реакции. По истечении указанного времени в реагирующую смесь можно добавить 1 — 2 капли физиологического раствора для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов.
Учет результатов. Наличие агглютинации эритроцитов означает, что кровь донора несовместима с кровью реципиента и не должна быть ему перелита. Если по истечении 5 мин агглютинация эритроцитов отсутствует, то это означает, что кровь донора совместима с кровью реципиента по групповым агглютиногенам.
Классификация и характеристика групп крови и резус-фактора
Групповые антигены классифицируются по единой системе АВ0 (а, б, ноль). Установленная концепция разделяет состав кровяных телец на 4 основных вида. Их отличия в альфа и бета агглютининах в плазме, а также присутствие специфических антигенов на оболочке эритроцитов, которые обозначаются буквами А и В.
Таблица «Характеристика классов крови»
Разновидность | Описание |
1 группа или нулевая | Антигены в кровяных тельцах отсутствуют. При этом плазма содержит альфа и бета-агглютинины |
2 группа (А) – самая распространённая | В оболочке кровяных телец присутствуют антитела группы А, а в самой плазме имеется только бета-агглютинин |
3 группа (В) | Эритроциты содержат антиген В, а в плазме присутствует только альфа-антитело |
4 группа (АВ) | Кровяные тельца в своей оболочке содержат антигены обеих групп (А и В), но в плазме отсутствуют агглютинины |
На групповую принадлежность национальность или раса людей не влияет.
Резус-фактор
Помимо системы АВ0, биологический материал классифицируют по фенотипу крови – наличию или отсутствию в ней специфического антигена D, который называется резус-фактором (Rh). Кроме белка D, система Rh охватывает ещё 5 основных антиген – C, c, d, E, e. Они содержатся во внешней оболочке эритроцитов.
Резус-фактор и класс кровяных телец закладываются у ребёнка ещё в утробе матери, и передаются ему от родителей на всю жизнь.
4.3. Непрямая проба Кумбса
В пробирку вносят одну каплю (0,02 мл) осадка трижды отмытых эритроцитов донора, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов и касаются ею дна пробирки, и добавляют 4 капли (0,2 мл) сыворотки реципиента. Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием, после чего их помещают на 45 мин в термостат при температуре +37°С. По истечении указанного времени эритроциты вновь трижды отмывают и готовят 5% взвесь в физиологическом растворе. Далее 1 каплю (0,05 мл) взвеси эритроцитов на фарфоровую пластинку, добавляют 1 каплю (0,05 мл) антиглобулиновой сыворотки и перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку периодически покачивают в течение 5 мин.
Учет результатов проводят невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.
Медицинский образовательный портал kbmk.info
Аппарат для переливания крови
Итоговая государственная аттестация (ИГА) Дисциплина/Тема: Хирургия/Переливание крови/Трансфузиология
«Если хирург и врач-трансфузиолог договариваются о литре красного и литре белого, вполне возможно, речь идет о переливании крови и плазмы»
Смотрите также другие тесты по хирургии
№ 2 * 1 -один правильный ответ Для гемостаза кровь в малых дозах переливают с целью 1) увеличения объема циркулирующей крови 2) ускорения свертываемости крови 3) повышения АД 4) улучшения деятельности сердца ! 2 № 3 * 1 -один правильный ответ При определении резус-фактора экспресс-методом в пробирке произошла агглютинация. Это означает, что кровь 1) резус-отрицательная 2) не совместима по резус-фактору 3) резус-положительная 4) совместимая по резус-фактору ! 3 № 4 * 1 -один правильный ответ Противопоказания к переливанию крови 1) тяжелая операция 2) тяжелое нарушение функций печени 3) шок 4) снижение артериального давления ! 2 № 5 * 1 -один правильный ответ Скорость вливания крови при биологической пробе 1) 50-60 капель в минуту 2) струйно 3) 20-30 капель в минуту 4) 30-40 капель в минуту ! 2 № 6 * 1 -один правильный ответ При проведении пробы на резус-совместимость крови донора и реципиента в пробирке произошла реакция агглютинации. Это говорит о том, что кровь 1) резус-положительная 2) совместима по резус-фактору 3) резус-отрицательная 4) несовместима по резус-фактору ! 4 № 7 * 1 -один правильный ответ Резус-фактор содержится в 1) плазме 2) лейкоцитах 3) эритроцитах 4) тромбоцитах ! 3 № 8 * 1 -один правильный ответ Группа крови, в которой содержатся агглютиногены А и В 1) первая 2) вторая 3) третья 4) четвертая ! 4 № 9 * 1 -один правильный ответ Агглютинины А и а находятся в 1) эритроцитах 2) лейкоцитах 3) плазме крови 4) других жидкостях организма ! 3 № 10 * 1 -один правильный ответ Процент людей с резус-положительной кровью 1) 15% 2) 50% 3) 85% 4) 100% ! 3 № 11 * 1 -один правильный ответ Компоненты пробы на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента 1) плазма донора и сыворотка реципиента 2) плазма реципиента и сыворотка донора 3) плазма донора и кровь реципиента 4) сыворотка реципиента и кровь донора ! 4 № 12 * 1 -один правильный ответ Признаки инфицирования крови во флаконе 1) плазма мутная, с хлопьями 2) плазма окрашена в розовый цвет 3) плазма прозрачная 4) кровь 3-х слойная, плазма прозрачная ! 1 № 13 * 1 -один правильный ответ Гемодез преимущественно используют для 1) парентерального питания 2) дезинтоксикации организма 3) борьбы с тромбозами и эмболиями 4) регуляции водно-солевого обмена ! 2 № 14 * 1 -один правильный ответ При определении группы крови по стандартным сывороткам агглютинация произошла с сывороткой 1-ой и 3-ей групп. Это означает, что кровь 1) первой группы 2) второй группы 3) третьей группы 4) четвертой группы ! 2 № 15 * 1 -один правильный ответ При проведении пробы на групповую совместимость крови донора и реципиента агглютинация отсутствовала. Это означает, что кровь 1) совместима по резус-фактору 2) совместима по групповой принадлежности 3) несовместима по резус-фактору 4) не совместима по групповой принадлежности ! 2 № 16 * 1 -один правильный ответ Состав крови II группы 1)АА 2) ВА 3) АВ 4) О ! 1 № 17 * 1 -один правильный ответ Эритроцитарная масса применяется с целью 1) увеличения объема циркулирующей крови 2) парентерального питания 3) дезинтоксикации 4) лечения анемии ! 4 № 18 * 1 -один правильный ответ Реинфузия — это 1) переливание планцентарной крови 2) переливание аутокрови 3) переливание консервированной крови 4) прямое переливание крови ! 2 № 19 * 1 -один правильный ответ Плазмозамещающим действием обладает 1) фибринолизин 2) гемодез 3) манитол 4) реополиглюкин ! 4 № 20 * 1 -один правильный ответ Состояние пациента в начале гемотрансфузионного шока 1) адинамичный 2) беспокойный 3) неконтактный 4) вялый ! 2 № 21 * 1 -один правильный ответ Реакция агглютинации — это 1) понижение свертываемости крови 2) иммунизация крови резус-фактором 3) внутрисосудистое свертывание крови 4) склеивание эритроцитов с последующим их разрушением ! 4 № 22 * 1 -один правильный ответ Кровь В (III) группы можно вводить лицам 1) только с III группой крови 2) с любой группой крови 3) только с III и IV группами крови 4) со II и III группами крови ! 1 № 23 * 1 -один правильный ответ При осмотре флакона с консервированной кровью установлено, что кровь хранилась 25 дней. Ваше заключение о годности крови 1) кровь инфицирована и не пригодна для переливания 2) кровь годна для переливания 3) просрочен срок хранения, переливать нельзя 4) кровь гемолизирована, переливать нельзя ! 3 № 24 * 1 -один правильный ответ Для проведения биологической пробы следует 1) ввести струйно однократно 25 мл крови и наблюдать за состоянием больного 5 мин. 2) ввести струйно трижды по 25 мл крови с интервалом 5 мин, наблюдая за больным 3) ввести капельно 25 мл крови, наблюдать за состоянием больного 5 минут 4) ввести капельно троекратно по 25 мл крови ! 2 № 25 * 1 -один правильный ответ При переливании крови состояние больного ухудшилось, появилась боль в пояснице и за грудиной. Это указывает на 1) геморрагический шок 2) цитратный шок 3) гемотрансфузионный шок 4) пирогенную реакцию ! 3 № 26 * 1 -один правильный ответ При появлении признаков гемотрансфузионного шока при переливании крови необходимо 1) сменить систему и вводить кровезаменители 2) отключить систему, удалить иглу из вены 3) уменьшить скорость и продолжать гемотрансфузию 4) продолжить гемотранфузию и срочно ввести наркотики ! 1 № 27 * 1 -один правильный ответ Результат реакции агглютинации при определении группы крови по стандартным сывороткам определяется через 1) 1 мин 2) 2 мин 3) 3 мин 4) 5 мин ! 4 № 28 * 1 -один правильный ответ Для стабилизации донорской крови используют 1) глюкозу 2) 2,6% раствор цитрата натрия 3) глицерин 4) изотонический раствор ! 2 № 29 * 1 -один правильный ответ Максимальный срок хранения цельной крови 1) 7 дней 2) 14 дней 3) 21 день 4) 28 дней ! 3 № 30 * 1 -один правильный ответ Препаратом крови является 1) альбумин 2) эритроцитарная масса 3) лейкоцитарная масса 4) нативная плазма ! 1 № 31 * 1 -один правильный ответ При геморрагическом шоке, в первую очередь, следует перелить больному 1) цельную кровь 2) плазму 3) полиглюкин 4) тромбоцитарную массу ! 3 № 32 * 1 -один правильный ответ После переливания крови медсестра следит за 1) пульсом 2) пульсом и АД 3) диурезом 4)пульсом, АД и диурезом ! 3 № 33 * 1 -один правильный ответ Компонент крови, обладающий наиболее выраженным гемостатическим эффектом 1) лейкоцитарная масса 2) плазма 3) эритроцитарная масса 4) эритроцитарная взвесь ! 2 № 34 * 1 -один правильный ответ Донорская кровь хранится в холодильнике при температуре 1) -2-0 градусов 2) 0-2 градусов 3) 4-6 градусов 4) 7-10 градусов ! 3 № 35 * 1 -один правильный ответ При нарушении техники переливания крови может развиться осложнение 1) цитратный шок 2) анафилактический шок 3) гемотрансфузионный шок 4) воздушная эмболия ! 4 № 36 * 1 -один правильный ответ Срок хранения флакона с остатками крови после переливания 1) 6 часов 2) 12 часов 3) 24 часа 4) 48 часов ! 3 № 37 * 1 -один правильный ответ При определении группы крови после предварительной оценки результата добавляется 1) цитрат натрия 2) изотонический раствор хлорида натрия 3) гипертонический раствор хлорида натрия 4) дистиллированная вода ! 2 № 38 * 1 -один правильный ответ Титр стандартной сыворотки для определения группы крови должен быть не менее 1) 1:8 2) 1:32 3) 1:64 4) 1:16 ! 2 № 39 * 1 -один правильный ответ Количество ячеек на тарелке, заполняемых стандартными сыворотками, при определении группы крови 1) 3 2) 6 3) 7 4) 4 ! 2 № 40 * 1 -один правильный ответ К плазмозаменителям не относится 1) полиглюкин 2) сыворотка крови 3) желатиноль 4) реополиглюкин ! 2 № 41 * 1 -один правильный ответ Донором крови может быть здоровый человек в возрасте от 1) 16 до 55 лет 2) 18 до 60 лет 3) 18 до 55 лет 4) 16 до 50 лет ! 3 № 42 * 1 -один правильный ответ Донорство противопоказано при наличии в анамнезе 1) отита 2) аппендицита 3) вирусного гепатита 4) пневмонии ! 3 № 43 * 1 -один правильный ответ Из крови человека готовят 1) гидролизин 2) желатиноль 3) полиглюкин 4) альбумин ! 4 № 44 * 1 -один правильный ответ Полиглюкин преимущественно используется для 1) парентерального питания 2) дезинтоксикации 3) борьбы с шоком 4) ускорения свертываемости крови ! 3
4.4. Проба на совместимость с применением 10% желатина
В пробирку вносят 1 небольшую каплю (0,02 — 0,03) мл эритроцитов донора, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов и касаются ею дна пробирки, добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) сыворотки реципиента. Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием, после чего их помещают в водяную баню на 15 мин или термостат на 30 мин при температуре +46 — 48°С. По истечении указанного времени в пробирки добавляют 5 — 8 мл физиологического раствора и перемешивают содержимое путем 1 — 2-кратного переворачивания пробирок.
Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.
Что могут предпринять несовместимые пары?
Метод лечения несовместимости супругов зависит от установленного диагноза.
- При иммунном бесплодии может проводиться лимфоцитиммунотерапия, которая позволяет изменить состояние иммунной системы матери в сторону защиты эмбриона. Этот метод лечения может сочетаться с иммунными препаратами либо гормонотерапией.
- При генетическом бесплодии рекомендуется применение методов вспомогательной репродукции, которые позволяют до подсадки эмбриона оценить его хромосомный и генный набор, чтобы исключить передачу наследственных заболеваний.
- При наличии антиспермальных антител паре рекомендуется минимум 1 месяц жить с презервативом, чтобы снизить уровень сенсибилизации мужского и женского организма. Одновременно с этим назначается десенсибилизирующая и иммуносупрессивная терапия.
4.5. Проба на совместимость с применением 33% полиглюкина
В пробирку вносят 2 капли (0,1 мл) сыворотки реципиента 1 каплю (0,05) мл эритроцитов донора и добавляют 1 каплю (0,1 мл) 33% полиглюкина. Пробирку наклоняют до горизонтального положения, слегка потряхивая, затем медленно вращают таким образом, чтобы содержимое ее растеклось по стенкам тонким слоем. Такое растекание содержимого пробирки по стенкам делает реакцию более выраженной. Контакт эритроцитов с сывороткой больного при вращении пробирки следует продолжать не менее 3 мин. Через 3 — 5 мин в пробирку добавляют 2 — 3 мл физиологического раствора и перемешивают содержимое путем 2 — 3-х кратного перевертывания пробирки, не взбалтывая.
Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.
[/td]
Когда проводится определение группы крови
Показаниями для определения группы крови являются:
- необходимость переливания крови;
- подготовка к операциям. Любая операция – это риск; при определенных обстоятельствах может возникнуть необходимость возместить кровопотерю, и тогда врачи должны знать, какую кровь для этого можно использовать;
- ведение беременности. В некоторых случаях возможна несовместимость групп крови матери и ребенка. При конфликте по группе крови ребенок может родиться с гемолитической болезнью новорожденных (гемолитической желтухой). Для определения группы крови ребенка сразу после рождения берут на анализ пуповинную кровь. Но о конфликте по группе крови можно судить и в процессе вынашивания – по уровню антител в крови матери. Риск несовместимости по группе крови между матерью и ребенком высчитывается исходя из вероятной группы крови ребенка, которая, в свою очередь, зависит от того, какая группа крови у матери и у отца. Вот для оценки этого риска и необходимо сдавать анализ на определение группы крови при беременности.
Определение группы крови
Когда у врачей возникает необходимость узнать группу крови, анализ, как правило, делается заново. Так поступают, чтобы полностью исключить возможность ошибки в результате использования неверных данных. Врач не будет спрашивать группу крови у пациента, поскольку отвечает за его жизнь и должен иметь стопроцентную уверенность, что группа крови определена правильно.
Но знать свою группу крови (и группу крови своих детей) всё равно полезно. Во-первых, никто не может быть застрахован от чрезвычайных ситуаций. А во-вторых, есть определенная зависимость между группой крови и предрасположенностью к различным заболеваниям.
Можно ли делать ЭКО при несовместимости супругов?
Да, конечно! Экстракорпоральное оплодотворение является методом выбора помощи парам, которые столкнулись с несовместимостью. У репродуктологов есть уникальная возможность нивелировать отрицательное воздействие неблагоприятных факторов внутренней среды, которые нарушают процесс наступления беременности.
В репродуктивном пары могут получить полный комплекс услуг по диагностике и лечению даже самых редких форм бесплодия. В нашем центре проводятся обследования, которые помогают выявить точную причину несовместимости супругов, чтобы подобрать наиболее оптимальные способы решения проблемы. Мы сопровождаем пару на всех этапах пути к долгожданному родительству. Записывайтесь на консультацию в «СМ-Клиника» в удобные часы приема!